13-BR188 - Brazol (Reagente a base de fenol para extração de ácidos nucléicos e proteínas) -100mL
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13-BR188 - Brazol (Reagente a base de fenol para extração de ácidos nucléicos e proteínas) -100mL
LGC
Extração Purificação De Ácidos Nucléicos

 O BRAZOL é um reagente utilizado no isolamento de RNA a partir de amostras de células e tecidos. O BRAZOL é a versão otimizada do popular método passo-único de isolamento total de RNA, baseado na metodologia desenvolvida por Chomczynski & Sachi (1, 2, 3).
Esta metodologia de extração tem se mostrado altamente eficaz na purificação de ácidos nucléicos a partir de materiais biológicos, tais como: soro, plasma, sangue total coletado ou não com EDTA, células obtidas a partir de cultivos e/ou tecidos congelados. O protocolo a seguir foi padronizado para aplicação em protocolos de amplificação e outras técnicas comuns em laboratórios de Biologia Molecular. Esta técnica é confiável e possui bom desempenho para diferentes quantidades de amostras.
 
O BRAZOL combina as propriedades do fenol e do isotiocianato de guanidina, que inibem imediata e efetivamente a atividade da enzima RNAse. As células presentes na amostra biológica são lisadas através deste reagente e, após homogeneização e adição de clorofórmio e posterior centrifugação, o produto resultante é separado em duas fases visíveis: aquosa e orgânica, respectivamente.

O RNA permanece exclusivamente na fase aquosa, o DNA pode ser encontrado na interfase entre a fase orgânica e a fase aquosa e as proteínas exclusivamente na fase orgânica (azul). O RNA pode ser precipitado através da adição de isopropanol gelado seguido de lavagens com etanol 70% e dissolvido em água ou tampão TE. O DNA e as proteínas podem ser precipitados através da adição de etanol e isopropanol, seguido de lavagem com etanol.
 
Precauções especiais de manuseio: O BRAZOL contém fenol (tóxico) e isotiocianato de guanidina (cáustico) que podem provocar queimaduras e, se ingerido, pode ser fatal. Ao empregá-lo em rotinas laboratoriais utilize sempre luvas, avental e protetor para os olhos. Evite o contato com a pele ou com a roupa e não inale seu vapor.
Leia as notas de advertência contidas no frasco que acondiciona o produto.
Em caso de contato acidental: enxágüe imediatamente a região atingida com abundante água, por pelo menos 15 minutos e procure imediatamente orientação médica.
 
Reagentes necessários, não fornecidos:

  • Clorofórmio; pode ser substituído por 1-bromo-3-cloropropano (5)
  • Isopropanol
  • Etanol

Informações

 O BRAZOL é um reagente utilizado no isolamento de RNA a partir de amostras de células e tecidos. O BRAZOL é a versão otimizada do popular método passo-único de isolamento total de RNA, baseado na metodologia desenvolvida por Chomczynski & Sachi (1, 2, 3).
Esta metodologia de extração tem se mostrado altamente eficaz na purificação de ácidos nucléicos a partir de materiais biológicos, tais como: soro, plasma, sangue total coletado ou não com EDTA, células obtidas a partir de cultivos e/ou tecidos congelados. O protocolo a seguir foi padronizado para aplicação em protocolos de amplificação e outras técnicas comuns em laboratórios de Biologia Molecular. Esta técnica é confiável e possui bom desempenho para diferentes quantidades de amostras.
 
O BRAZOL combina as propriedades do fenol e do isotiocianato de guanidina, que inibem imediata e efetivamente a atividade da enzima RNAse. As células presentes na amostra biológica são lisadas através deste reagente e, após homogeneização e adição de clorofórmio e posterior centrifugação, o produto resultante é separado em duas fases visíveis: aquosa e orgânica, respectivamente.

O RNA permanece exclusivamente na fase aquosa, o DNA pode ser encontrado na interfase entre a fase orgânica e a fase aquosa e as proteínas exclusivamente na fase orgânica (azul). O RNA pode ser precipitado através da adição de isopropanol gelado seguido de lavagens com etanol 70% e dissolvido em água ou tampão TE. O DNA e as proteínas podem ser precipitados através da adição de etanol e isopropanol, seguido de lavagem com etanol.
 
Precauções especiais de manuseio: O BRAZOL contém fenol (tóxico) e isotiocianato de guanidina (cáustico) que podem provocar queimaduras e, se ingerido, pode ser fatal. Ao empregá-lo em rotinas laboratoriais utilize sempre luvas, avental e protetor para os olhos. Evite o contato com a pele ou com a roupa e não inale seu vapor.
Leia as notas de advertência contidas no frasco que acondiciona o produto.
Em caso de contato acidental: enxágüe imediatamente a região atingida com abundante água, por pelo menos 15 minutos e procure imediatamente orientação médica.
 
Reagentes necessários, não fornecidos:

  • Clorofórmio; pode ser substituído por 1-bromo-3-cloropropano (5)
  • Isopropanol
  • Etanol